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革蘭氏染色
革蘭氏染色
革蘭氏染色

革蘭氏染色

  • 價格¥25
  • 單位
  • 貨號HKF3029
  • 品牌浩克

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【產品信息】

產品名稱產品貨號規(guī)格價格
革蘭氏染色HKF302925元
一、 實驗原理
革蘭氏染色法是微生物學中廣泛使用的一種鑒別染色法,可用來區(qū)分革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-),基本原理是基于細菌細胞壁化學組分不同。細菌經結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成不溶于水的結晶紫-碘復合物。革蘭氏陽性細菌由于細胞壁較厚,不含類脂,富含肽聚糖并交聯(lián)形成致密網格結構,在用乙醇處理時肽聚糖網孔收縮,能將結晶紫-碘復合物阻留在細胞壁內,使其呈現(xiàn)結晶紫的紫色。而革蘭氏陰性細菌因其細胞壁薄,肽聚糖含量低且交聯(lián)松散。遇乙醇時富含類脂的外膜溶解,在細胞壁上出現(xiàn)較大縫隙,結晶紫-碘復合物流出,因此經乙醇脫色后細胞又成無色。此時再經番紅復染,革蘭氏陰性細菌將被染成紅色。
  • 實驗步驟

1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。

2、革蘭氏染色:切片滴加革蘭氏染液A滴染10s-30s,水洗,甩干;滴加革蘭氏染液B1min,水洗,甩干;巴氏吸管吸取革蘭氏染液C從載玻片磨砂面一端沖洗組織進行分化,至切片流下的革蘭氏染液C呈無色即可,水洗,甩干;將切片浸革蘭氏染液D溶液1s水洗,鏡檢,烤箱烤干。

3、脫水:將烤干的切片快速入三缸無水乙醇快速脫水,依次1s、3s、5s。

4、透明封片:切片放入干凈的二甲苯5min透明,中性樹膠封片。

5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

  • 結果判讀:

革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。

注意事項:

1、染色過程中的革蘭氏染液C分化是關鍵步驟,需注意分化程度。

2、盡量不要重復染色,分化液在脫去片子顏色的同時也改變了細胞壁的通透性,影響了最后結果的準確性。

3、冬季氣溫較低時,染色時間可適當延長。

暫無

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