【產(chǎn)品信息】

【產(chǎn)品簡介】

ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒是一種高靈敏度的化學(xué)發(fā)光試劑盒，基本原理是以魯米諾（luminol）為基礎(chǔ)的ECL化學(xué)發(fā)光。本產(chǎn)品能與二抗上偶聯(lián)的辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生熒光，通過用 X 光片壓片或其它適當(dāng)熒光成像設(shè)備（CCD 相機等）檢測樣品。

本公司生產(chǎn)的基本型ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒用于低豐度較難檢測的目的蛋白，可檢測到 fg 級含量的蛋白，且發(fā)光穩(wěn)定。

【產(chǎn)品組成 】

【儲存與運輸】

冰袋（wet ice）運輸；4℃避光保存，有效期 12 個月。如果長期不用，可以-20℃保存。

【使用方法】

1. 配制基本型?ECL 工作液：將基本型?ECL A 液和基本型?ECL B 液按照1:1混合，注意 4℃避光保存。現(xiàn)配現(xiàn)用。
2. Western 實驗中 PVDF 膜經(jīng)二抗孵育后，多次洗滌，濾紙吸去多余液體。在曝光匣上貼兩層 PE 手套或者其他透明薄膜，將 PVDF 膜的蛋白面朝上放在曝光匣兩層薄膜之間，加入混合好的ECL工作溶液覆 蓋在膜上放置 1-2 min。
3. 用濾紙或吸水紙吸去ECL工作液，蓋上層薄膜開始壓膠片。
4. 壓完的膠片用顯影、定影試劑進行顯影和定影。根據(jù)發(fā)光強度調(diào)整曝光條件。

【注意事項】

1. 基本型ECL A 液和基本型ECL B 液在吸取過程中必須要更換吸頭，A 液和 B 液相互污染后會導(dǎo)致A液 B液逐漸失效，另外金屬離子的污染會降低本試劑的靈敏度，請注意用干凈吸頭。使用后密封保存。
2. 如果曝光后背景很深，可能原因有二抗?jié)舛冗^高，或一抗?jié)舛冗^高，或者封閉液不合適，換用其他封閉液。
3. 如果熒光迅速淬滅，可能原因是目的條帶熒光過強，導(dǎo)致 HRP 迅速消耗ECL。
4. 如果沒有發(fā)光信號，可能是目的蛋白表達很弱，可延長壓片時間。
5. NaN₃能抑制HRP活性，應(yīng)避免使用NaN₃。
6. 操作時請穿實驗服，佩戴一次性手套