【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

Polybrene（聚凝胺，hexadimethrine bromide）是一種聚溴化季銨陽離子，可顯著提高慢病毒(lentivirus)、腺病毒(adenovirus)等病毒對(duì)細(xì)胞的感染效率，作用機(jī)理可能是通過中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥從而促進(jìn)吸附作用。Polybrene也是一種有名的抗肝素劑（肝素拮抗劑），常用來生產(chǎn)非特異性凝集的紅細(xì)胞。另外Polybrene也多用于蛋白測(cè)序，因?yàn)樾┝康腜olybrene在自動(dòng)測(cè)序分析可明顯改善多肽的降解現(xiàn)象。PVDF膜加入polybrene還能提高膜的親和性。

本產(chǎn)品以溶液形式提供，粉末用0.9% NaCl配制成10 mg/mL的溶液，并用0.22 μM濾膜過濾除菌。使用時(shí)一般按1:1000-1:2000 稀釋，細(xì)胞種類不同稀釋比例不同，具體查閱相關(guān)文獻(xiàn)。

【儲(chǔ)存方式】

-20℃保存，有效期2年。

【使用方法】

操作前注意事項(xiàng)

1.為避免反復(fù)凍融，收到本產(chǎn)品或本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃保存；
2.因?yàn)镻olybrene對(duì)某些細(xì)胞可能有一定的毒性，而且Polybrene長(zhǎng)時(shí)間作用(大于12小時(shí))也可能對(duì)某些細(xì)胞產(chǎn)生毒性，所以初次使用Polybrene處理細(xì)胞，建議先做毒性測(cè)試；
3.本產(chǎn)品可能對(duì)人體有一定的毒害作用，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)，以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)；
4.本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用，不得用于臨床醫(yī)學(xué)診斷及其他非合理用途；
5.為了您的安全與健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

操作步驟

推薦工作濃度：

Polybrene最佳終濃度因不同細(xì)胞株而異，通常范圍在2~10μg/ml，最常用的濃度為5~8μg/ml?？梢酝ㄟ^查閱相關(guān)文獻(xiàn)或者預(yù)實(shí)驗(yàn)來摸索。

使用方法：

a.Day1：按實(shí)驗(yàn)需要將細(xì)胞鋪板(比如12孔板)。細(xì)胞數(shù)以第2天密度約50%為宜。37℃培養(yǎng)過夜。
b.Day2：病毒感染前，從-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化，參考相關(guān)文獻(xiàn)或者根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)得到的MOI值用新鮮完全培養(yǎng)基將病毒稀釋成所需濃度，并加入適量Polybrene，輕輕混勻。
c.吸除細(xì)胞原有培養(yǎng)基，將病毒液+培養(yǎng)基+Polybrene加入細(xì)胞中，輕輕搖勻。37℃繼續(xù)培養(yǎng)。
d.Day4：吸除含病毒的培養(yǎng)基，換為新鮮的培養(yǎng)基。此時(shí)可以加入相應(yīng)抗生素進(jìn)行篩選。
e.Day5-6：根據(jù)需要收集細(xì)胞檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)。